本文原载于《中华眼科杂志》年第6期
真菌性角膜炎是发展中国家的常见感染性眼病，发病率呈上升趋势[1,2,3,4,5]。其临床药物治疗效果不佳，为我国及其他发展中国家的主要致盲性角膜病之一[6,7,8]。因为其菌谱分布具有地域性，且会随生活条件、气候等因素产生变迁，所以对某一地区内的病原学及药物敏感性特征进行连续性回顾，对该地区的临床医师将具有切实的指导意义[3,5]。本研究通过回顾近10年菌谱分布、药物敏感性数据，以期对临床诊断与治疗真菌性角膜炎提供切实有效的参考。
资料和方法
一、资料来源
收集年1月至年12月于首都医科医院北京同仁眼科中心门诊疑为真菌性角膜炎，并送检真菌培养的患者例，其中男性例，女性例。分析患者的一般资料、病原学及药物敏感性试验结果及其变迁。
二、真菌培养及鉴定方法
疑为真菌感染的角膜标本接种于马铃薯葡萄糖琼脂（potatodextroseagar，PDA）斜面固体培养基（北京陆桥技术有限公司），置于28℃、40%湿度下的恒温恒湿培养箱中培养3~10d后，分离阳性标本中菌落至PDA平皿（天津金章公司）。对丝状真菌菌落行小培养法种属鉴定，鉴定依据为肉眼菌落特征、小培养后光镜下菌丝及孢子特征。对酵母样真菌行生化反应鉴定法，采用API20CAUX酵母菌鉴定卡（法国BioMerieu公司）鉴定至种水平。挑取纯培养菌落配置2.0麦氏浊度菌液，分装至鉴定卡，与既往研究中的方法一致[9,10,11]。
三、真菌药物敏感性试验方法
采用Rosco纸片扩散法进行药物敏感性检测。将真菌菌落挑至生理盐水中，制成麦氏浊度为0.5~1.0的均匀菌液。将菌液均匀涂布于PDA平皿后，贴上Neo-Sensitab药敏纸片（丹麦Rosco公司）。试验药物包括：那他霉素、特比萘芬、伊曲康唑、氟康唑、两性霉素B、伏立康唑。28℃、40%湿度下培养24~48h后测量抑菌圈直径，根据直径大小判定敏感、中度敏感或耐药。抑菌圈指真菌生长被完全抑制的环形区域，判别标准见表1[9]。
四、数据分析
采用SPSS20.0软件进行数据分析，计数资料的组间差异应用卡方检验，阳性率及构成比的年度变化趋势应用Spearman相关分析，P0.05为差异有统计学意义。
结果
一、一般资料分析
例标本中，真菌培养阳性例，阳性率为26.1%，共分离出真菌株，其中1份标本分离出2种真菌。共有株真菌鉴定出种属，涵盖29属40种；未鉴定出菌属的真菌占1.2%（17/）。男性及女性患者标本的真菌培养阳性率分别为26.8%（/）和24.8%（/）。标本真菌培养阳性的患者中，男女比例为1.77∶1，年龄为11d至95岁，平均（49.0±16.9）岁。标本真菌培养阳性的例患者中，儿童（≤14岁）22例，阳性率为8.7%（22/）；青少年（14岁且≤20岁）16例，阳性率为11.3%（16/）；成年人（20岁且≤60岁）例，阳性率为29.6%（/）；老年人（60岁）例，阳性率为21.0%（/）。成年患者最多、阳性率最高，占总阳性标本数的77.7%（/）。
二、真菌培养阳性率随时间的变化
各年真菌培养阳性率变化见表2。年度阳性率变化为下降趋势（r=-0.，P=0.）。按时间进行分层分析发现，前、后5年的培养阳性率分别为29.3%（/）和23.0%（/），差异有统计学意义（χ2=29.，P=0.）。
三、真菌种属分布及变化
1．角膜真菌种属分布：
角膜感染真菌以丝状真菌为主，占97.6%（/），酵母样真菌仅占2.4%（25/）。角膜真菌种属分布见表3，前3位常见菌属依次为镰刀菌属、曲霉属及链格孢属，共占真菌总数的84.8%。
2．真菌种属随时间的变化：
前后5年真菌种属分布比较见表4。镰刀菌属、无孢子群的比例下降，曲霉属、链格孢属及其他少见种属的比例上升。前、后5年丝状真菌构成比分别为98.5%（/）和96.5%（/），酵母样真菌构成比分别为1.5%（12/）和3.5%（23/），差异有统计学意义（χ2=6.，P=0.）。3个常见种属随月份的比例变化见图1。
四、真菌药物敏感性
1．药物敏感率：
不同药物敏感情况见表5。
2．常见种属真菌的药物敏感率：
常见种属真菌的药物敏感率见表6。
讨论
真菌性角膜炎为发展中国家常见的感染性角膜炎[1]。其菌谱特征具有随地域、随时间变化的趋势，影响因素多[2,8,9,12,13,14]。连续回顾地域性真菌菌谱特点及变迁，对于临床诊断及治疗具有实际的指导价值[3]。
本研究例患者绝大部分来自北京、河北、山东、山西、河南、安徽、东北三省及内蒙古自治区，因此分析结果对我国北方地区特征的针对性较强。研究发现，丝状真菌依旧是我国北方地区真菌性角膜炎的主要致病真菌，成年、男性为主要患者群，这与多地区研究及我院既往研究结论相一致，并与我国真菌性角膜炎的危险因素依然以角膜外伤为主有关[2,3,4,7,9,11,12,13,15]。前后5年比较发现，丝状真菌的比例下降，而酵母样真菌上升，其原因可能与广谱抗生素及免疫抑制剂的广泛使用后，眼表菌群失调，酵母样真菌的易感性增加有关[7]。对于相对少见的酵母样真菌的角膜感染，应引起临床医师的
